Elettroforeżi: għalxiex, għalxiex u kif issir

Kontenut

• Għalxiex
• Kif isir
• Tipi ta 'elettroforeżi
• 1. Elettroforeżi tal-emoglobina
• 2. Elettroforeżi tal-proteina

L-elettroforeżi hija teknika tal-laboratorju mwettqa bl-għan li tissepara l-molekuli skont id-daqs u l-ċarġ elettriku tagħhom sabiex tkun tista 'ssir id-dijanjosi tal-mard, l-espressjoni tal-proteina tkun tista' tiġi vverifikata jew il-mikroorganiżmi jkunu jistgħu jiġu identifikati.

L-elettroforeżi hija proċedura sempliċi u bi prezz baxx, li tintuża f'rutini tal-laboratorju u fi proġetti ta 'riċerka. Skond l-iskop ta 'l-elettroforeżi, jista' jkun meħtieġ li jsiru testijiet u eżamijiet oħra sabiex tintlaħaq dijanjosi, per eżempju.

Għalxiex

L-elettroforeżi tista 'titwettaq għal diversi skopijiet, kemm fi proġetti ta' riċerka kif ukoll fid-dijanjosi, peress li hija teknika sempliċi u bi prezz baxx.Għalhekk, l-elettroforeżi tista 'ssir għal:

• Identifika viruses, fungi, batterji u parassiti, b'din l-applikazzjoni tkun aktar komuni fi proġetti ta 'riċerka;
• Test tal-paternità;
• Iċċekkja l-espressjoni tal-proteini;
• Identifika mutazzjonijiet, billi tkun utli fid-dijanjosi tal-lewkimji, pereżempju;
• Analizza t-tipi ta 'emoglobina li tiċċirkola, billi tkun utli fid-dijanjosi ta' anemija taċ-ċellula sickle;
• Ivvaluta l-ammont ta 'proteini preżenti fid-demm.

Skond l-iskop ta 'l-elettroforeżi, jista' jkun meħtieġ li jsiru testijiet komplementari oħra biex it-tabib itemm id-dijanjosi.

Kif isir

Biex tagħmel l-elettroforeżi huwa meħtieġ il-ġell, li jista 'jkun ta' poliakrilamide jew agarose skont l-għan, buffer tal-elettroforeżi u bettija, markatur tal-piż molekulari u żebgħa fluworexxenti, flimkien ma 'tagħmir tad-dawl UV jew LED, magħruf ukoll bħala transilluminatur .

Wara li tipprepara l-ġell, għandu jitpoġġa oġġett speċifiku biex jagħmel il-bjar fil-ġell, popolarment imsejjaħ il-moxt, u ħalli l-ġell joqgħod. Meta l-ġell ikun lest, applika biss is-sustanzi fuq il-bjar. Għal dan, markatur tal-piż molekulari għandu jitqiegħed f'wieħed mill-bjar, kontroll pożittiv, li hija s-sustanza li hija magħrufa x'inhi, kontroll negattiv, li jiggarantixxi l-validità tar-reazzjoni, u l-kampjuni li għandhom jiġu analizzati. Il-kampjuni kollha għandhom jitħalltu ma 'żebgħa fluworexxenti, billi b'dan il-mod huwa possibbli li jiġu viżwalizzati l-istrixxi fuq it-transilluminatur.

Il-ġell bil-kampjuni għandu jitqiegħed fil-bettija ta 'l-elettroforeżi, li fiha s-soluzzjoni buffer speċifika, u allura l-apparat jinxtegħel sabiex ikun hemm kurrent elettriku u, konsegwentement, differenza potenzjali, li hija importanti għas-separazzjoni tal-partikoli skond għat-tagħbija u d-daqs tagħhom. Il-ħin ta 'tħaddim elettroforetiku jvarja skont l-iskop tal-proċedura, u jista' jdum sa siegħa.

Wara l-ħin determinat, huwa possibbli li wieħed jara r-riżultat tal-ġirja elettroforetika mit-transilluminatur. Meta l-ġell jitqiegħed taħt dawl UV jew LED, huwa possibbli li tara l-mudell tal-istrixxi: iktar ma tkun kbira l-molekula, inqas timmigra, tersaq eqreb lejn il-bir, filwaqt li iktar ma tkun ħafifa l-molekula, iktar ikun kbir il-potenzjal migratorju.

Biex ir-reazzjoni tkun ivvalidata, huwa neċessarju li l-faxex tal-kontroll pożittiv jiġu viżwalizzati u li fil-kontroll negattiv ma jkun viżwalizzat xejn, għax inkella hija indikazzjoni li kien hemm kontaminazzjoni, u l-proċess kollu għandu jiġi ripetut.

Tipi ta 'elettroforeżi

L-elettroforeżi tista 'ssir għal skopijiet differenti u, skond l-iskop tagħha, jistgħu jintużaw diversi tipi ta' ġel, l-aktar komuni huma polyacrylamide u agarose.

L-elettroforeżi biex jiġu identifikati mikroorganiżmi hija iktar komuni li ssir f'laboratorji ta 'riċerka, madankollu, għal skopijiet dijanjostiċi, l-elettroforeżi tista' tintuża biex tidentifika mard ematoloġiku u mard li jevolvi biż-żieda fl-ammont ta 'proteini, billi huma t-tipi ewlenin ta' elettroforeżi:

1. Elettroforeżi tal-emoglobina

L-elettroforeżi tal-emoglobina hija teknika tal-laboratorju mwettqa biex tidentifika t-tipi differenti ta 'emoglobina li tiċċirkola fid-demm, li tagħmilha possibbli li tiġi identifikata l-preżenza ta' mard relatat mas-sinteżi tal-emoglobina. It-tip ta 'emoglobina huwa identifikat permezz ta' elettroforeżi f'pH speċifiku, idealment bejn 8.0 u 9.0, b'disinn ta 'meded li jkun ivverifikat li jista' jitqabbel mal-mudell normali, li jippermetti l-identifikazzjoni tal-preżenza ta 'emoglobini anormali.

Għalxiex huwa magħmul: L-elettroforeżi tal-emoglobina titwettaq biex tinvestiga u tiddijanjostika mard relatat mas-sintesi tal-emoglobina, bħall-anemija taċ-ċellula sickle u l-marda tal-emoglobina C, minbarra li hija utli biex tiddistingwi t-talassemija. Tgħallem kif tinterpreta l-elettroforeżi tal-emoglobina.

2. Elettroforeżi tal-proteina

L-elettroforeżi tal-proteina hija eżami mitlub mit-tabib biex jivvaluta l-ammont ta 'proteini li jiċċirkolaw fid-demm u, għalhekk, biex jidentifikaw mard. Dan it-test isir minn kampjun tad-demm, li huwa ċentrifugat biex tinkiseb il-plażma, liema parti tad-demm, li tikkonsisti, fost sustanzi oħra, minn proteini.

Wara l-elettroforeżi, jista 'jiġi viżwalizzat mudell ta' meded u, sussegwentement, graff li fiha l-kwantità ta 'kull frazzjoni ta' proteini hija indikata, li hija fundamentali għad-dijanjosi.

Għalxiex huwa magħmul: L-elettroforeżi tal-proteina tippermetti lit-tabib jinvestiga l-okkorrenza ta 'majeloma multipla, deidrazzjoni, ċirrożi, infjammazzjoni, mard tal-fwied, pankreatite, lupus u pressjoni għolja skont il-mudell tal-medda u l-graff ippreżentata fir-rapport tal-eżami.

Fhem kif isir u kif tifhem ir-riżultat tal-elettroforeżi tal-proteini.